PENANAMAN ORKID SECARA KULTUR TISU

DEFINISI KULTUR TISU

·         Teknologi Tisu Kultur merupakan satu cara menghasilkan anak pokok yang lengkap didalam makmal yang bermula dengan pemilihan bahan untuk dikultur seperti bahagian daun, batang, pucuk atau sel tisu yang diambil dari tanaman terpilih dan dikulturkan dalam media secara steril.

·          Bahagian kecil ini dipotong-potong halus dalam keadaan steril dan dimasukkan kedalam bekas media pembiakan dalam petri disc.

·         Media kultur lazimnya daripada bahan GEL (Agar) yang mengandungi nutrien seperti gula, vitamin dan hormon yang akan memberikan makanan kepada keratas yang akan menjadi KALUS (Calus) membesar dengan cepat bagi membentuk 'plantlet'. Telah dibuktikan di makmal seperti penghasilan tisu pisang dan orkid mampu memproses sehingga 1 juta anak pokok setahun bergantung kepada kapasiti makmal.

·         Makmal adalah lokasi asas untuk membuat proses tisu kultur yang dilengkapi dengan peralatan lengkap yang agak mahal dan sensitif dengan sanitasi (kebersihan dan steril). Kegagalan menghasilkan plant let disebabkan oleh berlakunya pencemaran oleh bahan lain yang menggangu kejayaan pembentukkan plantlet dan kalus (Lihat foto kalus dibawah). 

KEBAIKAN KULTUR TISU

 (a)    Untuk menghapuskan virus-virus atau penyakit-panyakit daripada pokok yang dijangkitinya

(b)   Selain itu, ia berguna untuk menghasilkan klon-klon yang banyak dengan mudah dan cepat.

(c)   Pembiakan beberapa spesies yang resalan, seperti pokok buah-buahan terutamanya pembiak bakaan spesies baka-baka luar adalah dalam keadaan heterozigot. Keadaan ini tidak berubah untuk beberapa keturunan apabila dibiak secara klon. Pokok-pokok ini mempunyai tempoh remaja yang lebih panjang menyebabkan ia tidak dapat menghasilkan buah dengan cepat. Maka, dengan cara ini, tempoh penghasilan buah menjadi lebih singkat dan cepat.

(d)   Tumbuhan yang susah dibiak dengan menggunakan biji benih boleh dibiak melalui cara ini

(e)   Membolehkan klon yang berbaka baik daripada tumbuhan yang tidak menghasilkan buah, misalnya pokok orkid.

(f)    Sebenarnya, kaedah kultur tisu juga merupakan salah satu cara untuk menghasilkan klon.

KEBURUKAN KULTUR TISU

1.      Tiada variasi genetik yang menjadikan sesuatu organisma lebih tahan dan hidup dengan lebih baik dalam persekitaran. Malah, klon-klon lebih mudah dipengaruhi perubahan keadaan persekitaran dan penyakit baru dan populasinya mungkin terhapus oleh faktor-faktor ini.

2.      Pengeluaran klon dalam jumlah yang besar mungkin akan menyebabkan tumbuhan dan haiwan lain terpinggir. Lama kelamaan keadaan ini boleh membawa kepada pengurangan biodiversiti.

JENIS-JENIS  KULTUR TISU

Terdapat pelbagai jenis kultur tisu di antaranya ialah :

1. Kultur Kalus

Kalus merupakan kumpulan tisu yang tidak berorganisasi dan tidak mempunyai bentuk. la dihasilkan oleh pembahagian sel yang giat. Di dalam suatu kultur, proses terbentuknya kalus diaruh dengan meletak kepingan kecil tisu atau eksplan ke dalam medium yang mengandungi sebatian tumbesaran atau bahan kimia pengawal atur. Proses pembezaan sel tumbuhan diterbalikkan. Tisu eksplan dikatakan mengalami penyahbezaan. Kalus bertambah isipadunya, tetapi ia masih tidak berorganisasi.

2. Kultur Sel atau Kultur Ampaian

Sel tumbuhan yang tidak berorganisasi dapat dikulturkan bukan sahaja sebagai kalus pada medium pepejal, tetapi juga sebagai sel bebas di dalam medium cecair yang digoncangkan. Kultur sel atau kultur ampaian biasanya didapati dengan memindahkan kalus yang rapuh ke dalam medium cair. Melalui goncangan, sel tunggal akan tercerai dan membentuk rantai atau kumpulan sel apabila sel-sel itu membahagi.

Kultur sel dapat dikekalkan sebagai:

3. Kultur Sekelompok

Ini adalah suatu bentuk kultur sel, iaitu sel disimpan di dalam sesuatu medium yang mempunyai isipadu yang tetap sehingga pertumbuhan berhenti. Tumbesaran berhenti kerana setelah habisnya nutrien di dalam medium, atau berkumpulnya metabolit yang merencatkan tumbesaran.

4. Kultur Selanjar

Dalam kaedah ini medium steril dibekalkan secara berterusan.

5.Kultur Sel Tunggal

Kultur ini boleh dimulakan daripada sel tunggal tumbuhan. Ini dilakukan denean cara menaois airmaian sel melalui satu nenanis. Hanva sel tuneeal dan kumpulan sel yang kecil sahaja yang dapat melalui penapis itu. Ampaian yang diperoleh kemudiannya diplatkan ke atas medium pepejal di dalam piring petri. Koloni kalus yang berasingan dapat dikesan di bawah mikroskop dan dipindahkan ke dalam medium baru. Suatu strain atau klon sel tunggal dapat diperoleh dengan cara ini.

6. Kultur Protoplas

Protoplas terdiri daripada sitoplasma dan nukleus tanpa dinding sel. la amat mudah mengalami kerosakan kimia atau fizikal. Protoplas berupaya menumbuhkan semula dinding sel yang baru dan kemudian membahagi. Setiap protoplas dapat menghasilkan satu koloni sel, dan kemudian suatu koloni kalus. Suatu tumbuhan keseluruhan, dapat dihasilkan daripada kalus yang berasal daripada kalus yang berasal daripada suatu protoplas tunggal.

7. Kultur Organ

Organ tumbuhan juga dapat dikulturkan. Organ tumbuhan yang digunakan terdiri daripada dua jenis:

  > Organ determinat

     Tisu yang telah pun membentuk struktur khas yang mempunyai saiz dan bentuk yang khusus,  contohnya daun, bunga dan buah.

   > Organ inderminat

    Tisu yang belum membeza dan tidak terhad pertumbuhannya contohnya meristemapeks daripada akar dan pucuk.

TUJUAN KULTUR TISU

Tujuan utama kultur tisu adalah untuk membiakkan sel tumbuhan untuk menghasilkan organisma baru yang sama dengan induknya dari segi fizikal dan kandungan genetik.

KAEDAH KULTUR TISU

–    Daun dibuang daripada pucuk apeks tumbuhan orkid yang terpilih. Pucuk ini direndam ke dalam larutan 10% natrium hipoklorit selama 10 minit untuk membunuh sebarang mikroorganisma yang hadir.

–     Serpihan-serpihan tisu meristem (eksplan) dipotong daripada pucuk dan direndam ke dalam larutan 1%    natrium hipoklorit selama 5 minit.

–    Tisu dikultur di dalam medium steril yang mengandungi nutrien dan hormon tumbuhan dengan pH yang sesuai

–    Kelalang disimpan di dalam inkubator pada suhu 35-40°c selama beberapa minggu.

–    Mitosis berulang oleh sel-sel meristem akan menghasilkan tisu-tisu kalus.

–    Tisu kalus akan dipindahkan ke dalam kelalang baru yang mengadungi medium nutrient yang baru. Ini untuk memastikan bekalan nutriuen dan hrmon tumbuhan yang sesuai adalah mencukupi bagi pertumbuhan dan perkembangan.

–    Sel-sel akan terus membahagi melalui mitosis dan kemudian terbezakan menjadi anak-anak pokok.

–   Selepas beberapa minggu, tumbuhan orkid dikeluarkan dan ditanam di dalam pasu atau di atas tanah diaman ia tumbuh sehingga matang.

KAEDAHNYA.

 

1.      Keluarkan anak orkid dengan mengunakan penyepit yang telah disterilkan.

2. Basuhkan anak orkid menggunakan air. Pastikan tiada agar-agar (jelly) melekat diakar pokok.

3. Rendamkan anak orkid itu kedalam larutan anti fungus selama 10 hingga 15 minit.

4. Tuskan dan keringkan anak orkid itu di atas kertas suratkhabar selama setengah jam (hanya letakkan di atas kertas suratkhabar dan dianginkan)

5. Setelah itu balutkan akar anak orkid dengan lumut air atau sabut kelapa dan masukkan kedalam pasu mengikut saiznya (pasu yang kecil dipanggil thumbpot)

6. Untuk anak pokok yang terlalu kecil kumpulkan dan ditanam didalam satu pasu (pasu ini dipanggil compot)

7. Letakkan di tempat yang teduh dan tidak terkena air hujan.

8. Siram/semburkan baja penyubur sebanyak 2 atau 3 kali seminggu.

9. Apabila sudah membesar, pindahkan ke pasu yang besar sedikit mengikut saiz yang bersesuaian dengan anak orkid. Ulangi proses pemindahan ini 2 atau 3 kali sehingga orkid matang.